ヒト血液・免疫モデル作製法
- ヒト造血幹細胞を移植する方法
骨髄抑制処置を施したマウスにヒト臍帯血由来CD34陽性細胞（hCD34+ HSC)を移入する方法
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ヒト末梢血を移植する方法
未処置のマウスにヒト末梢血単核球（hPBMC）を移入する方法
注）移入後は、ヒトT細胞の増加に比例して徐々にGVHDが発症します。
GVHD発症を回避するためにNOG-MHC classI, II KO (NOG-ΔMHC）マウスも作製しています。
hPBMC移入後4週でのT細胞分化
ヒトCD3+ T細胞が良く生着し、CD4+ T細胞・CD8+ T細胞も認められています。
hPBMC移植プロトコール
ヒト末梢血からFicollで単核球hPBMCを分離 ⇒ 2〜10x106個のhPBMCを静脈より移入
移植後2-3週で末梢血中にT細胞が検出され、脾臓・肺・肝臓などにも多くのT細胞が浸潤しています。
hPBMC移入ヒト化NOG マウスデータ
ロットの異なるhPBMC移入後（5x106個）のヒトCD45+細胞の出現
細胞のロット間に差はあるが、全ての個体で20％以上の生着を認めました。
6週後のT細胞分化
ロットによってCD4+細胞・CD8+細胞・CD4+CD8+細胞の比率は顕著に異なります。
hPBMC移入後の体重変化
NOGマウスにhPBMC（1x107個）を移入すると、3週前後から体重が減少し、1〜2ヶ月程度でGVHDにより全て死亡します。
GVHDを回避するマウスの開発
NOG-ΔMHC (MHC class I, II double KO)
NOG-MHC class I, II KO（NOG-ΔMHC）マウス
hPBMC移入後のGVHDを回避するヒト化マウス
マウスMHC構成分子であるb2m・I-Ab両遺伝子を欠損させることにより、移入ヒトT細胞によるGVHD反応が顕著に抑制されます。そのため、hPBMC移入後の長期的な実験が可能となりました。
hPBMC移入後のNOGおよびNOG-ΔMHCマウスの生存率
NOG-ΔMHCマウスはGVHDを回避し80日以上生存しました。
hPBMC移入後のGVHDスコア（ NOG vs NOG-ΔMHC ）
NOG-ΔMHCマウスは、GVHD症状をほとんど示しません。
NOG-ΔMHCマウスへのhPBMC移入後のヒト白血球の生着
NOG-ΔMHCマウスではNOGマウスと同等程度にhCD45+細胞が生着します。
NOGおよびNOG-ΔMHCマウス共に、生着した白血球の大部分がT細胞で占められます。
NOG-ΔMHCマウスはNOGマウスとほぼ同等にhCD4+・hCD8+ T細胞が生着します。
代表的な実験動物
